Diluciones seriadas
En muchos casos se necesita preparar disoluciones con concentraciones extremadamente bajas de un soluto, hasta un punto que es difícil o imposible en la práctica medir la cantidad necesaria de producto sólido o el volumen de solución madre. En esas situaciones es necesario preparar una solución de mayor concentración (solución de stock o solución madre) y hacer diluciones sucesivas a partir de ésta hasta alcanzar la concentración deseada.
banco de diluciones seriadas
En otros casos, muy frecuentes en estudios biológicos, se intenta analizar la variación de algún parámetro que depende de la concentración de un soluto y se necesita preparar soluciones con distintas concentraciones del mismo.
En este caso es muy conveniente hacer un banco de diluciones seriadas que no son más que un tipo de diluciones sucesivas manteniendo constante el factor de dilución en cada paso.
El banco de diluciones seriadas tiene muchas ventajas prácticas, desde los cálculos previos, pasando por la manipulación de volúmenes y hasta en la representación gráfica de resultados.
un cálculo sencillo
La primera ventaja de un banco de diluciones seriadas es que todo el cálculo es muy sencillo. Sólo hay que tener en cuenta la concentración inicial, el volumen que se quiere conseguir de cada concentración y el factor de dilución.
El volumen necesario se asume que es el mismo para todas las concentraciones y depende de cada experimento. Es fácil ver que el volumen final que se consigue de cada concentración es exactamente igual al volumen fijo de solvente (Vf) con que se cargan todos los tubos del banco.
El factor de dilución (F) se calcula o aproxima sabiendo las concentraciones máxima y mínima que se quieren estudiar y el número de concentraciones distintas que se quieren hacer.
El cálculo de las concentraciones en los tubos sucesivos es tan sencillo como multiplicar la concentracion del anterior por el factor de dilución (1/2, 1/10 u otro).
dos operaciones manuales
Otra ventaja es que sólo hay que repetir dos operaciones manuales. La primera es la carga de los los tubos con solvente, en todos el mismo volumen fijo (Vf) . La segunda consiste en el transvase de un determinado volumen de paso (Vp) , siempre el mismo, de un tubo al siguiente y agitar.
Esta sencillez facilita que no se cometan errores, ya que en todo el proceso sólo hay que prestar atención a la correcta medida repetitiva de un mismo volumen y a no saltarse ningún tubo.
fácil representación gráfica en escala logarítmica
Independientemente del factor de dilución, el logaritmo de la concentración de los distintos tubos permite hacer representaciones con todos los puntos igualmente separados.
Esto es muy útil, porque si sólo se quiere visualizar el cambio de algún parámetro en función de la concentración, basta con hacer marcas igualmente separadas en el eje sin necesidad de hacer ningún cálculo para adaptar la escala.
calculadora
Esta utilidad muestra y permite calcular todos los parámetros relevantes de un banco de diluciones seriadas.
- Si se cambia la concentración inicial o final, o el número de tubos, calcula el factor de dilución y el volumen de paso.
- Si se cambia el factor de dilución, calcula la concentración final y el volumen de paso (el factor de dilución admite y calcula expresiones como 1/5 o 1:5).
- Si se cambia el volumen fijo, calcula el volumen de paso.
- Facilita interpolar valores en una representacion logarítmica.
Un ejercicio interesante puede ser la elaboración manual de los cálculos matemáticos que realiza esta pequeña aplicación.
Diluciones seriadas Inmunología
Julian Arango
Video pedagógico que explica brevemente el fundamento de las diluciones seriadas.
Concentrations Part 5 – serial dilution
Greg Petersen
Fifth video in a series of videos discussing concentration calculations commonly used in a laboratory. More specifically a molecular biology lab. This particular video shows the basics behind setting up and calculating a serial dilution. This procedure can be used to establish a standard curve from a solution of known concentration.
iLabBook Diluciones Seriadas – Mediano.m4v
Maximino Manzanera
Método para estimar el número de células cultivables presentes en una muestra, mediante técnica de siembra en gota. Con este método se ahorra en tiempo y materiales con respecto a la siembra tradicional de diluciones seriadas.